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TALEN基因敲除小鼠
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  • TALEN基因敲除小鼠

华东15选5复式价格表: TALEN基因敲除小鼠

华东15选5浙江风采网 www.hdnka.com 產品報價:詢價

更新時間:2015/3/26 14:02:23

地:北京

牌:百奧賽圖

號: 基因敲除小鼠

廠商性質: 生產型,服務型,

公司名稱: 北京百奧賽圖基因生物技術有限公司

產品關鍵詞:

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喬艷樂 : () (010-56315318)

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TALEN基因敲除小鼠

1、服務說明

由于傳統的同源重組方法效率低、周期長,因此北京百奧賽圖基因生物技術有限公司利用優化后的TALEN技術通過注射受精卵的方式實現快速獲得基因打靶的小鼠模型。

制備技術

產品類型

產品數量

服務周期

質量標準

TALEN

雜合子小鼠

不少于2只

4-6個月

PCR檢測陽性、測序正確

2、基因敲除小鼠的制備流程

1)、TALEN的構建

TALEN由四部分組成:N端序列,RVDs,C端序列,FokI。利用Type II限制性內切酶可以將RVD??櫸直鶘剎煌惱承閱┒?,同時又不留有酶切位點,通過GoldenGate反應實現RVDs與TALEN骨架的無縫連接。

 

2)、TALEN的蛋白質表達鑒定

TALEN構建成功后,將其質粒轉染小鼠細胞系后,提取總蛋白,進行SDS-PAGE電泳,利用標簽抗體進行western blotting檢測其表達。

 

3)、TALEN的體外活性檢測

 

套峰檢測

TALEN質粒轉染小鼠細胞系,1~2天后提取細胞基因組DNA,PCR擴增靶位點序列,進行DNA測序,通過spacer區域出現套峰情況評價TALEN的活性。

錯配酶檢測

將靶序列PCR擴增子進行變性-退火,進行錯配酶(MSDase)反應,將MSDase的消化產物進行電泳,通過比較切割條帶與非切割條帶的比例,即可反映出TALEN的活性高低。

 

4)、受精卵注射及基因敲除小鼠的基因型鑒定

利用體外轉錄試劑盒將有活性的TALEN分別體外轉錄為mRNA后進行受精卵注射。將打靶的胚胎移植到代孕母鼠的輸卵管,經過19-20天的孕育后F0代基因敲除小鼠出生,并進行基因型鑒定。

北京百奧賽圖基因生物技術有限公司

| 第8

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