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Cell Counting Kit(CCK-8)試劑盒 40203ES60
Cell Counting Kit(CCK-8)試劑盒 40203ES60
  • Cell Counting Kit(CCK-8)試劑盒 40203ES60

华东15选5预测专家推荐号码: Cell Counting Kit(CCK-8)試劑盒 40203ES60

华东15选5浙江风采网 www.hdnka.com 產品報價:150元

更新時間:2019/10/14 8:41:36

地:上海

牌:翊圣生物

號: 40203ES60

廠商性質: 生產型,貿易型,服務型,

公司名稱: 上海翊圣生物科技有限公司

產品關鍵詞: 40203ES60   WST-8屬于MTT的升級產品   廣泛應用于細胞增殖和細胞毒   CCK   MTT   cell counting kit   cck-8  

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翊圣生物 : (13916792673) (400-6111-883)

(聯系我時,請說明是在來寶網上看到的,謝謝?。?/b>


Cell Counting KitCCK-8)試劑盒

產品信息

產品名稱

產品編號

規格

價格(元)

Cell Counting KitCCK-8CCK-8試劑盒

40203ES60*

100 T

150.00

Cell Counting KitCCK-8CCK-8試劑盒

40203ES76*

500 T

480.00

Cell Counting KitCCK-8CCK-8試劑盒

40203ES80*

1000 T

920.00

Cell Counting KitCCK-8CCK-8試劑盒

40203ES88*

1000 T

1833.00

Cell Counting KitCCK-8CCK-8試劑盒

40203ES92*

10×1000 T

5122.00

檢測原理

Cell Counting Kit-8簡稱CCK-8試劑盒,是一種基于WST-8(化學名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽)的廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。

WST-8屬于MTT的升級產品,工作原理為:在電子耦合試劑存在的情況下,可以被線粒體內的脫氫酶還原生成高度水溶性的橙黃色的甲臜產物(formazan)。顏色的深淺與細胞的增殖成正比,與細胞毒性成反比。使用酶標儀在450nm波長處測定OD值,間接反映活細胞數量。

CCK-8法應用非常廣泛,如藥物篩選、細胞增殖測定、細胞毒性測定、腫瘤藥敏試驗以及生物因子的活性檢測等。

保存條件

4℃干燥避光保存,有效期一年(推薦)。-20℃干燥避光保存,有效期二年。

CCK-8方法的優勢

1)表1 CCK-8法與其他細胞增殖/毒性檢測方法的優勢比較

檢測方法

MTT

XTT

WST-1

CCK-8

甲臜產物的水溶性

差(需加有機溶劑溶解后再檢測)

產品性狀

粉末

2瓶溶液

溶液

1瓶溶液

使用方法

配成溶液后使用

現配現用

即開即用

即開即用

檢測靈敏度

很高

很高

檢測時間

較長

較短

較短

最短

檢測波長

560-600 nm

420-480 nm

420-480 nm

430-490 nm

細胞毒性

高,細胞形態完全消失

很低,細胞形態不變

很低,細胞形態不變

很低,細胞形態不變

試劑穩定性

一般

較差

一般

很好

批量樣品檢測

可以

非常適合

非常適合

非常適合

便捷程度

一般

便捷

便捷

非常便捷

 

2)酚紅和血清對CCK法的檢測不會造成干擾;

3)細胞毒性非常低,因此加入WST-8顯色后,可以在不同時間反復用酶標儀讀數從而找到最佳測定時間。

注意事項

1)建議先做幾個孔摸索接種細胞的數量和加入CCK-8試劑后的培養時間。

2)有條件的情況下建議采用多通道移液器,可以減少平行孔間的差異。加入CCK-8試劑時,建議斜貼著培養板壁加,不要插到培養基液面下加,容易產生氣泡,會干擾OD值讀數。

3)白細胞可能需要培養較長時間。

4)如果沒有450 nm的濾光片,可以使用吸光度在430-490 nm之間的濾光片,但是450 nm濾光片的檢測靈敏度最高。

5)培養基中酚紅的吸光度可以在計算時,通過扣除空白孔中本底的吸光度而消去,因此不會對檢測造成影響。

6)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

CCK-8試劑盒操作說明

. 制作標準曲線(測定細胞具體數量)

1、先用細胞計數板計數所制備的細胞懸液中的細胞數量,然后接種細胞到培養板內。

2、按比例(例如:1/2比例)依次用培養基等比稀釋成一個細胞濃度梯度,一般要做3-5個細胞濃度梯度,每個濃度建議3-6個復孔。

3、接種后培養2-4小時使細胞貼壁,然后加CCK-8試劑培養1-4 h后測定OD值,制作出一條以細胞數量為橫坐標(X軸),OD值為縱坐標(Y軸)的標準曲線。根據此標準曲線可以測定出未知樣品的細胞數量(使用此標準曲線的前提是實驗的條件要一致,便于確定細胞的接種數量以及加入CCK-8后的培養時間。)

【注】當使用標準96孔板時,貼壁細胞的最小接種量至少為1,000 /(100 μL 培養基)。檢測白細胞時的靈敏度相對較低,因此推薦接種量不低于2,500 /(100 μL 培養基)。如果要使用24孔板或6孔板實驗,請先計算每孔相應的接種量,并按照每孔培養基總體積的10%加入CCK-8溶液。

. 細胞活性檢測

1、在96孔板中接種細胞懸液(100 μL/孔)。將培養板放在培養箱中預培養一段時間(37℃,5% CO2)。

2、向每孔加入10 μL CCK-8溶液(注意不要在孔中生成氣泡,它們會影響OD值的讀數)。

3、將培養板在培養箱內孵育1-4小時。

4、用酶標儀測定在450 nm處的吸光度。

5、若暫時不測定OD值,可以向每孔中加入10 μL 0.1MHCL溶液或者1% w/v SDS溶液,并遮蓋培養板避光保存在室溫條件下。24小時內測定,吸光度不會發生變化。

. 細胞增殖-毒性檢測

1、在96孔板中配制100 μL的細胞懸液。將培養板放在培養箱預培養24小時(37℃,5% CO2)。

2、向培養板中加入10 μL不同濃度的待測物質。

3、將培養板在培養箱孵育一段適當的時間(例如:6、12、2448小時)。

4、向每孔加入10 μL CCK-8溶液(注意不要再孔中生成氣泡,它們會影響OD值的讀數)。

5、將培養板在培養箱內孵育1-4小時。

6、用酶標儀測定在450 nm處的吸光度。

7、若暫時不測定OD值,可以向每孔中加入10 μL 0.1MHCL溶液或者1% w/v SDS溶液,并遮蓋培養板避光保存在室溫條件下。24小時內測定,吸光度不會發生變化。

【注】如果待測物質有氧化性或還原性的話,可在加CCK-8之前更換新鮮培養基(除去培養基,并用培養基洗滌細胞兩次,然后加入新的培養基),去掉藥物影響。當然藥物影響比較小的情況下,可以不更換培養基,直接扣除培養基中加入藥物后的空白吸收即可。

活力計算

細胞活力*(%)=[A(加藥)-A(空白)]/[A0加藥)-A(空白)] ×100
A(加藥):具有細胞、CCK-8溶液和藥物溶液的孔的吸光度
A(空白):具有培養基和CCK-8溶液而沒有細胞的孔的吸光度
A0加藥):具有細胞、CCK-8溶液而沒有藥物溶液的孔的吸光度
*細胞活力:細胞增殖活力或細胞毒性活力

 

 

 

HB190726